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发布日期：2024-09-26 作者：开博
华东师范年夜学生命科学学院研究员李鼎力团队，开辟了一种全新的高活性迷你基因编纂东西，可在小鼠体内实现高效编纂，丰硕了基因编纂东西的利用场景，为未来用在体内基因医治供给了高效的候选手艺。相干研究颁发在《份子细胞》，并被选为封面文章。
以CRISPR/Cas9为代表的基因编纂手艺，为根本生物学和疾病医治带来了重年夜变化。2021年，张锋团队发现了由IS200/IS605转座子超家族编码的IscB核酸酶。IscB被认为是Cas9可能的进化先人，具有与Cas9类似的布局域，且一样需要操纵一段非编码RNA（ωRNA）指导卵白辨认DNA，而其氨基酸长度仅为SpCas9的三分之一摆布。但是，IscB在哺乳动物细胞中的活性很是有限，可否经由过程工程化的革新提高IscB的基因编纂活性，到达与Cas9相当的活性，是当前需要解决的重要问题。
研究团队基在布局理性设计，在IscB卵白要害位置引物氨基酸突变，颠末三轮迭代挑选，取得了加强型IscB（定名为eIscB），eIscB的平均编纂效力较野生型平都可提高7.5倍。为提高IscB开博体育与方针DNA的亲和力，研究人员将eIscB与一个非序列特异性双链DNA连系卵白融会，获得了高活性IscB（定名为eIscB-D），eIscB-D的最高编纂效力可达91.3%。
进一步地，研究人员对ωRNA的分歧茎环布局进行革新，取得了高活性的ωRNA（定名为eωRNA），其长度较野生型缩短了20%，年夜幅下降了工业合成的难度。终究优化取得的eIscB-D/eωRNA编纂效力平都可晋升20.2倍。
研究团队专门制备了小鼠白化疾病模子，并初次证实eIscB-D不但可以在鼠源细胞系中发生高效编纂，还可以经由过程胚胎打针高效制备疾病动物模子。另外，研究人员开辟了超高活性的微型单碱基编纂器eiABE和eiCBE，最高位编纂效力别离可到达73.6%和79.2%。
《份子细胞》封面。图片由研究团队供给
研究团队介绍，封面设计图以中国风为主基调，长街上的两列灯笼代表DNA双链，体态小巧玲珑的小伴侣指代eIscB-D，多发卡布局的楼梯则是ωRNA。小伴侣踩着楼梯，一手摘下旧灯笼，另外一只手挂上新灯笼，这一精准而敏捷的替代动作意味着eIscB-D高效、小巧、正确的特点。
相干论文信息：https://doi.org/10.1016/j.molcel.2024.07.007
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