近日，中国科学院年夜连化学物理研究所副研究员乔庆龙和研究员徐兆超团队成长了组装介导的细胞膜缓冲荧光探针，实现了对细胞质膜的长时候不变标识表记标帜和超分辩动态荧光成像，不雅察到了质膜丝状伪足的动态活动和细胞外囊泡的排泄进程，发现了两种细胞外囊泡的融会模式，为细胞质膜的超分辩动态成像供给了东西。相干功效颁发在ACS Sensors上。

细胞质膜是将细胞与细胞外情况辨别开的磷脂双份子层布局，在调理物资进出细胞的进程中起着要害感化。质膜高度柔性的布局付与其高度的动态性，可以或许动态组装为各类纳米级子布局，如丝状伪足、细胞外囊泡等。这些子布局在保持细胞完全性、增进旌旗灯号传导和通信等方面起侧重要感化。虽然科研工作者对这些纳米级子布局的相干研究慢慢深切，可是高度的动态性和纳米级的尺寸使得原位及时可视化这些质膜子开博体育布局的动态行动很是坚苦，分歧功能子布局的构成和融会的具体机制和其异质性依然不清楚。

超分辩荧光成像可以或许在纳米标准下原位解析细胞布局，已成为研究质膜纳米布局和功能的有力东西。但是，因为细胞质膜探针光不变性不足的限制和细胞内化染色的问题，质膜动力学的超分辩荧光成像依然具有挑战性。

本工作中，团队将分歧长度的烷基链基团引入到带负电荷的荧光素中，开辟了细胞不成渗入的质膜“缓冲荧光探针”BMP-14和BMP-16。BMP探针可以或许构成荧光“暗态”的纳米堆积体，从而可以或许实现对证膜的特异性“光生”响应。不消长度烷基链可以调控探针堆积体与单体之间的解离均衡，以构成不变的缓冲池。当质膜上的探针产生光漂白，则可以快速招募来自缓冲池的探针，从而连结质膜荧光的不变性，实现对证膜的长时程超分辩成像。

团队操纵细胞质膜缓冲探针在纳米标准下监测了质膜的多种动态行动，包罗丝状伪足的发展和细胞外囊泡的排泄，监测到细胞外囊泡从丝状伪足的成熟与脱落进程，延续近11分钟。同时，团队也监测到囊泡在细胞膜上的迟缓萌芽进程，该进程可以到达22分钟以上。

另外，团队还发现了临近脂质融会与丝状脂质牵引融会的两种分歧囊泡融会模式。BMP-16优良的缓冲能力和对证膜高的信噪比，可以经由过程与质膜实现动态的连系，发生闪灼特征，实现了对证膜的单份子定位成像，定位精度到达36nm。

相干论文信息：https://doi.org/10.1021/acssensors.4c00486

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